常见杀菌剂对莴笋菌核病病菌的室内毒力分析

　　 摘 要： 为筛选对莴笋菌核病有较好防效的杀菌剂， 采用菌丝生长速率法测定了12种杀菌剂对莴笋菌核病病菌的毒力， 对其中5种毒力较强的杀菌剂进行了田间防效验证。咪鲜胺、戊唑醇、苯醚甲环唑、嘧菌酯、抑霉唑、多·福和菌核净对莴笋菌核病病菌的室内毒力较强， EC50分别为0.0136、0.0263、0.2092、0.2880、0.8806、1.1088、1.3635μg/mL;上述5种药剂对莴笋菌核病的田间防效分别为85.89%、82.39%、75.24%、71.81%和64.73%.在生产上， 推荐轮换使用咪鲜胺、戊唑醇或苯醚甲环唑、嘧菌酯3类药剂， 可提高对该病的田间防效， 并延缓病菌抗药性的产生。
　　
　 　关键词： 莴笋菌核病； 杀菌剂； 室内毒力； 田间防效；
　　
　　莴笋 （Lactuca sativa L） 又称莴苣， 属菊科 （Compositaeaceae） 一年生或两年生草本植物， 其富含丰富维生素、矿物质、氨基酸、蛋白质、糖分等营养物质， 深受消费者喜爱， 在我国南方地区广泛种植[1-3].然而， 近年来随着莴笋种植面积的增加， 田间病害的发生为害也日趋加重。其中， 菌核病尤为严重， 在露地和保护地栽培中均有发生。该病在莴笋整个生育期均可发生， 但在收获前期的茎部迅速膨大期扩展最为迅速。病害初期莴笋呈青枯状萎蔫， 严重时整株腐烂瘫倒， 上生白色菌丝和黑色鼠粪状菌核， 严重影响产量和品质[4].
　　
　　该病是由核盘菌 （Sclerotinia sp.） 引起的真菌性病害。病原菌寄主范围极广， 可寄生75科400种以上的植物[5].目前， 有关蔬菜菌核病发生、为害及防控技术研究的报道以油菜菌核病最多， 药剂防控仍是目前控制菌核病的主要措施[6].一直以来， 多菌灵、腐霉利、异菌脲等杀菌剂是防治菌核病的首选药剂。但是， 随着用药量和施药频率的增加， 多地菌核病病菌对多菌灵等苯并咪唑类杀菌剂产生了高抗性[7-9], 对腐霉利、异菌脲、菌核净等二甲酰亚胺类杀菌剂也表现出较强的抗药性风险[10], 两大类杀菌剂的防效逐年下降。所以需要研究筛选其他类型杀菌剂做为防治该病的替代药剂。
　　
　　胡起兴等采用菌丝生长速率法测定了咪鲜胺、苯醚甲环唑、腐霉利等10种杀菌剂对瓜叶菊菌核病菌的室内生物活性。咪鲜胺和腐霉利的活性较高， EC50分别为0.041 8、0.211 3μg/m L, 可在生产上交叉使用[11].周锋等测定了戊唑醇和菌核净的复配制剂对油菜菌核病的田间防效， 20~25 g/667m2处理的防效达67.1%~99.7%, 优于40%菌核净可湿性粉剂单剂20 g/667m264.9%的防效[12].郑德剑等调查了10种杀菌剂对莴笋菌核病病菌的生长抑制效果发现， 多菌灵、甲基硫菌灵、咪鲜胺和丁子·香芹酚对菌丝生长的抑制率均高于80%, EC50分别为0.040、0.040、0.008、0.005μg/m L[13].为筛选出对浙江莴笋菌核病有较高防效的杀菌剂， 笔者测定了12种常见杀菌剂对莴笋菌核病病菌的室内毒力， 并在此基础上， 选择毒力较高的杀菌剂进行田间防效验证， 以期为防控已严重影响浙江省莴笋产业发展的菌核病提供参考。
　　
　　 1 材料与方法
　　
　　1.1 毒力测定
　　
　　1.1.1 供试菌株与药剂
　　
　　莴笋菌核病的病菌菌株分离自浙江省杭州市农业科学研究院蔬菜所基地发病莴笋植株。供试药剂包括500 g/L异菌脲悬浮剂、430 g/L戊唑醇悬浮剂， 由拜耳作物科学 （中国） 有限公司提供；250 g/L嘧菌酯悬浮剂[先正达 （中国） 投资有限公司产品];70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、20%抑霉唑水乳剂， 由一帆生物科技集团有限公司提供；50%腐霉利可湿性粉剂 （河北中天邦正生物科技股份公司产品） ;70%多·福可湿性粉剂 （山东省济南一农化工有限公司产品） ;25%咪鲜胺乳油 （天津市东方农药有限公司产品） ;40%菌核净可湿性粉剂 （温州市鹿城植保化学有限公司产品） ;50%多菌灵可湿性粉剂 （江苏蓝丰生物化工有限公司产品） ;80%代森锰锌可湿性粉剂 （美国陶氏益农公司产品） .
　　
　　1.1.2 试验方法
　　
　　采用菌丝生长速率法测定12种杀菌剂对病菌的抑制作用。用双蒸水将上述12种杀菌剂配成1mg/m L母液 （各药剂折合为有效成分100%计算） , 取适量母液与55℃的PDA培养基混匀， 制成药剂浓度分别为0 （对照） 、0.05、0.10、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00、5.00μg/m L的含药平板。从预培养3 d的病菌菌落边缘取直径为12 mm的菌丝块， 接种到各含药平板上， 每皿1块。每处理重复3次。置26℃培养箱中培养54 h, 然后采用直尺十字交叉法测量菌落直径， 计算各药剂浓度对菌丝生长的抑制率。
　　
　　抑制率 （%） =[ （对照菌落直径-处理菌落直径） /对照菌落直径]×100.
　　
　　1.2 田间药效试验
　　
　　1.2.1 试验设计与管理
　　
　　试验在杭州市农业科学研究院蔬菜研究所基地进行。莴笋品种为无锡三青莴笋。试验田前茬即为莴笋， 菌核病发生均匀且严重。共设5个药剂处理：250 g/L嘧菌酯悬浮剂800倍液、10%苯醚甲环唑水分散粒剂1 000倍液、70%多·福可湿性粉剂800倍液、25%咪鲜胺乳油1 000倍液、430 g/L戊唑醇悬浮剂1 500倍液， 药剂来源与室内毒力测定试验相同。另设清水对照。各处理区采用随机区组排列。每处理3次重复。每小区10 m2.
　　
　　1.2.2 试验方法
　　
　　根据莴笋收获前14 d是菌核病发生高峰期的特点， 在莴笋收获前28 d开始施药。分别在2017年11月22日、11月29日、12月7日用喷雾器在每小区喷施药液800 m L, 第3次施药后14 d即收获前调查发病情况， 记载发病级别， 计算病情指数和防效。病害分级标准[14]:0级， 植株生长正常；1级， 植株下部1~2叶片变软发褐， 中上部叶片正常；2级， 下部5~10叶片变软发褐， 同时病害蔓延到茎秆， 植株无萎蔫；3级， 植株上部叶片已萎蔫， 下部叶片发褐枯死， 茎秆大部分发病；4级， 植株已枯死或倒伏。
　　
　　病情指数=[∑ （病级株数×该病级代表值） / （调查总株数×4） ]×100
　　
　　防治效果 （%） =[ （对照区病情指数-处理区病情指数） /对照病情指数]×100.
　　
　　1.3 数据统计与分析
　　
　　所得数据经SPSS软件进行处理分析， 求出毒力回归方程、EC50及r.采用新复极差法分析不同处理防效间差异显着性。
　　
　 　2 结果与分析
　　
　　2.1 杀菌剂对莴笋菌核病病菌的室内毒力
　　
　　12种杀菌剂对莴笋菌核病病菌的菌丝生长具有不同程度的抑制作用 （表1） .其中， 咪鲜胺和戊唑醇的抑制作用最强， 抑制中浓度EC50分别为0.013 6、0.026 3μg/m L;其次是苯醚甲环唑和嘧菌酯， EC50分别为0.209 2、0.288 0μg/m L;抑霉唑、多 （福、菌核净EC50比较接近， 在1μg/m L上下；腐霉利、代森锰锌EC50在6μg/m L上下；多菌灵、甲基硫菌灵EC50超过10μg/m L;异菌脲EC50为6 149.677 5μg/m L, 对菌丝生长的抑制作用不明显。试验中还发现， 抑霉唑、菌核净、腐霉利、甲基硫菌灵和异菌脲在低浓度时还会不同程度地促进病菌的菌丝生长。
　　
　　2.2 杀菌剂对莴笋菌核病的田间防效
　　
　　取室内毒力较高的5种杀菌剂， 以田间防效试验做验证， 发现不同处理对莴笋菌核病的防效存在差异 （表2） .第3次药后14 d, 各药剂处理区莴笋病情指数由低到高为咪鲜胺 （3.75） 、戊唑醇 （4.68） 、苯醚甲环唑 （6.58） 、嘧菌酯 （7.49） 、多·福 （9.37） , 相比清水对照区的病情指数 （26.57） 均有大幅下降。相应地， 25%咪鲜胺乳油处理的防效最高， 430 g/L戊唑醇悬浮剂次之， 但两者间差异不显着， 防效均在80%以上， 显着高于其他供试药剂；10%苯醚甲环唑水分散粒剂和250 g/L嘧菌酯悬浮剂防效居中， 均达70%以上， 也体现了一定的防病效果；70%多·福可湿性粉剂防效低于65%, 显着低于其他供试药剂。
　　 　　 　　
　 　3 结论与讨论
　　
　　室内毒力测定结果表明， 咪鲜胺、戊唑醇、苯醚甲环唑、嘧菌酯、抑霉唑、多·福、菌核净对莴笋菌核病菌菌丝生长有较强的抑制作用， 与胡起兴等采用相同方法测定的杀菌剂对瓜叶菊菌核病菌的抑制活性[11]有类似之处， 均认为菌核病病菌对咪鲜胺、苯醚甲环唑、戊唑醇较敏感。鉴于试验中发现抑霉唑和菌核净在低浓度时会促进莴笋菌核病菌菌丝生长， 故只选择咪鲜胺、戊唑醇、苯醚甲环唑、嘧菌酯和多·福进行田间防治莴笋菌核病试验。经过验证， 咪鲜胺、戊唑醇、苯醚甲环唑、嘧菌酯对该病的田间防效均在70%以上， 可有效防控田间莴笋菌核病的发生。其中， 咪鲜胺为咪唑类杀菌剂， 戊唑醇和苯醚甲环唑为三唑类杀菌剂， 嘧菌酯为甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。在防治实践中， 可轮换使用上述不同类型药剂， 以提高田间防效并减缓病菌抗药性的产生。
　　
　　防控莴笋菌核病， 不仅要明确病害的发生发展规律， 适期施药防控， 还需要结合农业防治 （轮作、及时清除病残体、适当稀植等） 、物理防治 （结合田闲时冬冻、夏晒等） 及生物防治 （施用生防菌剂等） 等措施， 将病害控制在经济阈值之内。
　　
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